لماذا نشاهد المناعات صفر عندما نفحص الطيور في عمر ٢٤ يوم لقياس مستوی مناعة اللقاح الزيتي المقتول بواسطه جهاز الايلايزا؟
الدكتور ميلاد ابراهيم عريبي
1/8/2024
يجب معرفه نوع المستضد antigen في كت الايلايزا ، ومعرفه المستضد antigen المستخدم عند الفحص بتقنیة تثبيط التراص ( HI ).
يجب ان يكون فحص العیاریة(titter ) بواسطه طريقه ال( Hi ) بإستخدام المستضد antigen معزول لنفس شركه اللقاحات الزيتيه المقتوله المحقونة في الطير، لاسباب كثيره شوف أشرحها بالتفصيل :.
يجب علينا فهم المستضد antigen الموجود في kit Elisa وهل هذا المستضد antigen قادر على التفاعل مع الأجسام المضادة antibody الموجود في المصل serum المتكون نتيجه حقن اللقاح الزيتي المقتول في الافراخ .
يستخدم فحص تثبيط التراص (HI) لمعايرة استجابة الأجسام المضادة للعدوى الفيروسية. يستفيد إختبار (HI ) من قدرة بعض الفيروسات على تكتل (ربط) خلايا الدم الحمراء، وبالتالي تشكيل "شبكة" ومنع خلايا الدم الحمراء من التكتل .
الفرق بين الفحصين ::
عند الفحص بواسطه تقنیة HI ، هنالك فيروس حي كامل وهذه هي صفه بايلوجيه طبيعيه للفيروس لكي يحدث تراص دموي ، حيث يقوم الفيروس بالارتباط مع خلايا الدم إذا لم يكن هنالك أجسام مضادة Antibodies يرتبط معها وبالتالي سوف يكون شبكه من كريات الدم الحمراء لذلك أي تحور في هذه العمليه سوف يستبعد تأثير الفيروس . يجب إستخدام فيروس حي وقوي له القدره على الاصابه، أما إستخدام اللقاحات كانتجينات في فحص ال HI فهو خاطىء لضعف الفيروس الموجود في اللقاحات . لذلك أنصح بإستخدام مستضدات antigens من نفس الشركات التي تصنع اللقاحات المقتوله .
اما بالنسبه لفحوصات الايلايزا، فيجب علينا أولا معرفه من أي شي صنع ال kit ، حیث أن أغلب الكتات في فحوصات الايلايزا مصنعه من ضروب مصليه مجزئه تسمى ( monoclonal ) ولقد شرحتها في التفصيل في محاضره سابقه كيف يتم تحضيرها تسمى monoclonal antibodies . وهي على عكس ال polyclonal antibodies . اي معناها ال kit يحتوي على epitope واحد يكون معروف ومكشوف لل antibodies في serum الدجاج الماخوذ للفحص ، مثلا هذا ال epitope يأخذ صفه الامراضيه ال ND مثل F protein ، أعطي مثال، لذلك سوف يقوم هذا ال epitope بالارتباط مع الاجسام المضادة antibodies الموجوده في المصل serum لكن بشرط ان يكون الطير ملقح بنفس الضرب المصلي المراد قياس titter له . لذلك يكون الفحص بواسطه جهاز الايلايزا دقيق جدا والكشف أدق بحيث أي تغير في F protein لن يستطيع الكشف عنه اي تعطي نتيجه سلبيه
بمعنى أن الفحص بالايلايزا ياخذ فقط epitope واحد يكون خاص أو مكشوف لفيروس أو إنزيم أو هرمون أو pathogen ، ولكن بشرط أن يكون هنالك تطابق بين الضرب المصلي الملقح وال epitope الموجود في ال kit عند الفحص . مثلا عند إعطاء لقاح مقتول في عمر معين، اللقاح يحتوي على فيروس فيه أكثر من ١٠٠٠ epitope ، وعند الفحص مثلا في عمر ٢٥ یوم بواسطه الايلايزا، سوف يقوم الفحص عن البحث عن epitope واحد مكشوف ومعروف لدى الشركه المصنعه ال kit كأن يكون ال epitope الذي نبحث عنه رقم ٣ وال epitope الموجود في ال KiT رقم ٤ وبالتالي لن يحدث تفاعل فتخطي نتيجه سالبه في الفحص، مع العلم ان الطير ملقح نفس الضرب المصلي . لذلك لايمكن معرفه ال epitope الموجود في ال KIT لانها من أسرار الشركات المصنعه .
اما بالنسبه لفحوصات الايلايزا، فيجب علينا أولا معرفه من أي شي صنع ال kit ، حیث أن أغلب الكتات في فحوصات الايلايزا مصنعه من ضروب مصليه مجزئه تسمى ( monoclonal ) ولقد شرحتها في التفصيل في محاضره سابقه كيف يتم تحضيرها تسمى monoclonal antibodies . وهي على عكس ال polyclonal antibodies . اي معناها ال kit يحتوي على epitope واحد يكون معروف ومكشوف لل antibodies في serum الدجاج الماخوذ للفحص ، مثلا هذا ال epitope يأخذ صفه الامراضيه ال ND مثل F protein ، أعطي مثال، لذلك سوف يقوم هذا ال epitope بالارتباط مع الاجسام المضادة antibodies الموجوده في المصل serum لكن بشرط ان يكون الطير ملقح بنفس الضرب المصلي المراد قياس titter له . لذلك يكون الفحص بواسطه جهاز الايلايزا دقيق جدا والكشف أدق بحيث أي تغير في F protein لن يستطيع الكشف عنه اي تعطي نتيجه سلبيه . بمعنى أن الفحص بالايلايزا ياخذ فقط epitope واحد يكون خاص أو مكشوف لفيروس أو إنزيم أو هرمون أو pathogen ، ولكن بشرط أن يكون هنالك تطابق بين الضرب المصلي الملقح وال epitope الموجود في ال kit عند الفحص . مثلا عند إعطاء لقاح مقتول في عمر معين، اللقاح يحتوي على فيروس فيه أكثر من ١٠٠٠ epitope ، وعند الفحص مثلا في عمر ٢٥ یوم بواسطه الايلايزا، سوف يقوم الفحص عن البحث عن epitope واحد مكشوف ومعروف لدى الشركه المصنعه ال kit كأن يكون ال epitope الذي نبحث عنه رقم ٣ وال epitope الموجود في ال KiT رقم ٤ وبالتالي لن يحدث تفاعل فتخطي نتيجه سالبه في الفحص، مع العلم ان الطير ملقح نفس الضرب المصلي .
التوصيات.
استخدام فحوصات HI ( antigen live ) . في حاله فحص ال antibodies للقاحات الزيتيه المقتوله .
- استخدام فحوصات Elisa في حاله فحص ال antibodies للقاحات الحيه .
